ScienCel內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基-無(wú)谷氨酰胺1001-NG

英文名：Endothelial Cell Medium – No Glutamine

貨號(hào) 1001-NG

產(chǎn)地 美國(guó)

縮寫(xiě) ECM-NG

規(guī)格 500 ml

用途 科研

包裝 瓶裝

保存 4℃冰箱

價(jià)格：￥2178.00

產(chǎn)品名稱(chēng)：ScienCel內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基-無(wú)谷氨酰胺1001-NG

dothelial cell medium – no glutamine (ECM-NG), when used with Endothelial Cell Growth Supplement (ECGS) and FBS is a complete medium designed for optimal growth of normal endothelial cells in vitro. It is a sterile, liquid medium which contains essential and non-essential amino acids, vitamins, organic and inorganic compounds, hormones, growth factors, trace minerals and a low concentration of fetal bovine serum (5%). The medium is HEPES and bicarbonate buffered and has a pH of 7.4 when equilibrated in an incubator with an atmosphere of 5% CO2/95% air. The medium is formulated (quantitatively and qualitatively) to provide an optimally balanced nutritional environment that selectively supports the growth of normal endothelial cells in vitro.

ECM-NG does not contain L-glutamine, an essential amino acid that is unstable in solution at 37°C. ECM-NG should be supplemented with L-glutamine (L-Glu; cat #0813)or stable L-glutamine dipeptide, L-alanyl-l-glutamine (LALG, Cat. #0733). The recommended LALG concentration ranges from 2mM to 10mM but may vary with culture conditions.

ECM-NG consists of 500 ml of basal medium, 25 ml of fetal bovine serum (FBS, Cat. #0025),5 ml of Endothelial Cell Growth Supplement (ECGS,Cat. #1052 and 5 ml of penicillin/streptomycin solution (P/S, Cat. #0503). Note: FBS, ECGS and P/S are not pre-mixed in ECM-NG; they must be added separately to make the complete ECM-NG.

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常見(jiàn)問(wèn)題問(wèn)答：

一、血清或培養(yǎng)基產(chǎn)生了顏色或沉淀的問(wèn)題：

問(wèn)：我用的是四季青的胎牛血清，56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀，是不是污染？還能不能 再用？血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日)。

答：應(yīng)該問(wèn)題不大。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中，37℃過(guò)夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因，但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。

二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)能否加血清？如果加了會(huì)有什么結(jié)果？為什么懸浮細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)就不能加血清？

答：血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中重要的培養(yǎng)成份之一，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)有廣泛影響。在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，我們通常會(huì)加入 10%的血清。血清的質(zhì)量對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的成功至關(guān)重要。一般說(shuō)來(lái)，牛血清包括以下成分：生長(zhǎng)因子(如激素，白細(xì)胞介 素等)，他們可以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)；貼附因子，他們可以促進(jìn)細(xì)胞的貼壁，往往只有細(xì)胞貼壁才能增值(懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞 除外)；蛋白質(zhì)(如血清白蛋白，球蛋白等)，既可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，又可以中止胰酶的作用；還有很多成分不明的物 質(zhì)。血清還可以起到解毒作用，如脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。血清還可以是細(xì)胞免受機(jī)械損傷。因此，無(wú) 論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞，血清是*的。除非因?qū)嶒?yàn)要求無(wú)血清培養(yǎng)時(shí)，例如：為使細(xì)胞同步化時(shí)，我們會(huì) 采用無(wú)血清培養(yǎng)的。單純的說(shuō)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)不能加血清就沒(méi)有太多的道理了。

三、血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn)，該如何處理：

答：血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但普的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成，而血纖維蛋白(形成 凝血的蛋白之一)在血渭解凍后，也會(huì)存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物，并不影響血清本身的質(zhì)量。

若您欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，以400g稍微離心，上清液即可接著加入培 養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物，因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。

四、如何避免沉淀物的產(chǎn)生？

答：我們建議您在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作 :

 (1)解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃ 至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

 (2)解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

 (3)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì) 因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。

 (4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。

 (5)若必須做血清的熱滅活，請(qǐng)遵守56℃，30 分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高，時(shí)間過(guò)久或搖 晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。