血清使用需要注意的問題

（一）被誤判為污染的“小黑點"

經過熱處理的血清，往往沉淀物會增多，而這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像是污染物，常常會讓研究者誤以為血清遭到污染。然而，把血清放在37℃環(huán)境中，又會使此沉淀物進一步增多，使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。

我們的經驗是拿到鏡下去觀察是否為細菌狀或真菌狀形態(tài)。還有就是做無菌培養(yǎng)，取一點血清在培養(yǎng)皿中，在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)幾天，觀察沉淀物是否有變化。一般情況下，這些沉淀物并不會影響血清的正常使用，Lab里往往用0.22μM的濾膜過濾一下就繼續(xù)使用了。

（二）解凍血清

解凍血清時，請遵循推薦的分步解凍方法（-20℃→4℃→室溫）。實驗表明，如果血清解凍溫度過高（如-20℃→37℃），很容易產生沉淀。解凍血清時，請隨時搖勻，使溫度和成分均勻，減少沉淀的發(fā)生。請不要長時間將血清放置在37℃環(huán)境中，如果放置時間過長，血清會變得混濁，血清中的許多不穩(wěn)定成分會受到破壞，從而影響血清的質量。血清的熱滅活很容易引起沉淀物的增加，我們認為這一步是不必要的。如需對血清進行熱滅活，請遵循56℃、30min原則，隨時搖勻。如果溫度過高、時間過長或搖晃不均勻，沉淀物就會增加。

血清中出現沉淀物的原因有很多，但最常見的是血清中脂蛋白的變性，解凍后血清中還會存在纖維蛋白（形成凝塊的蛋白質之一），這也是產生沉淀物的主要原因之一。然而，這些絮狀沉淀物雖然并不影響血清本身的質量，但有可能會被誤判為污染物。如果要去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝在無菌離心管中，以1200rpm的速度離心，然后將上清液加入培養(yǎng)基中進行過濾。

（三）保存血清

避免血清出現非污染性沉淀物的最好方法就是減少血清反復凍融的次數，所以血清少量分裝凍存是一個好方法。建議血清保存在-20～-5℃之間。如果以4℃保存，不要超過一個月。如果一次不能用完一瓶，建議將血清分裝到無菌離心管中，然后再凍存。

中文名 英文名稱 貨號 規(guī)格

WinSera® 優(yōu)級胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WS-002 500ml

WinSera® 特級胎牛血清 Fetal Bovine Serum FBS500-WP-002 500ml

WinSera®干細胞專用胎牛血清  Stem cells Qualified FBS500-WE-002(ES) 500ml

WinSera® 無外泌體血清  Exosome-depleted FBS FBS050-EXO 50ml

WinSera® AB血清 Human Serum AB HU050-S-011 100ml

WinSera®熱滅活胎牛血清  Heat Inactivated FBS FBS500-WH-002 500ml

WinSera®碳吸附胎牛血清  Dextran Stripped FBS FBS500-WCS-002 500ml

WinSera®透析胎牛血清  Fetal Bovine Serum, Dialyzed FBS500-WDF-002 500ml

WinSera®超低IGg胎牛血清  Low IgG FBS FBS500-WLG-002 500ml

WinSera®新生牛血清 NewbornCalfSerum NCS500-W-002 500ml

產品名稱：優(yōu)級胎牛血清

品牌：WinSera

貨號：FBS500-WS-002

規(guī)格：500ml

適用范圍及應用領域

1、疫苗的研發(fā)生產:人用疫苗：如冠疫苗、乙肝、甲肝、狂犬病疫苗、乙腦、人用出血熱等

獸用疫苗：豬瘟疫苗、禽感疫苗、獸用狂犬病疫苗等

2、生物醫(yī)藥及細胞培養(yǎng)領域:細胞培養(yǎng)；

抗原抗體的研發(fā)生產等；

為細胞制備提供的環(huán)境及增殖營養(yǎng)；

3、科研領域:高?？蒲?/span>

合同研究組織（科研外包CRO模式）醫(yī)院科研及檢驗用血清

診斷試劑的研發(fā)及生產

FBS500-WS-002胎牛血清培養(yǎng)細胞種類

1、常用細胞：VERA、293、293T、SF9、CHO細胞

2、神經細胞：PC12、SH-SY5Y

3、原代細胞：牛/豬睪丸原代細胞、原代 腫瘤細胞、大/小鼠原代神經細胞、原代腫瘤細胞

4、腫瘤細胞:HELA、HEPG2、A549二倍體細胞:MRC-5、KMB-17、2BS、SV-1

5、免疫細胞培養(yǎng)T細胞、B細胞、NK細胞、DC細胞干細胞培養(yǎng)間充質干細胞、胚胎干細胞、誘導多能干細胞單抗制備B細胞、骨髓瘤(SP0、SP2)、融合細胞(雜交瘤細胞等)

血清沉淀是污染嗎？

無論是較大的絮狀纖維蛋白還是小黑點樣的磷酸鈣，都容易被誤認為是細菌污染，但其實血清沉淀并不是污染。由于在37℃的溫度下培養(yǎng)，會加劇纖維蛋白的析出和磷酸鈣顆粒產生，可采用空培方式驗證污染，血清按所需比例加入無菌培養(yǎng)基中（不加雙抗），放培養(yǎng)箱中過夜，觀察空培外觀，若為澄清，則血清無污染。還可以通過將血清接種在細菌培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，觀察是否存在細菌增殖，并且進行革蘭氏染色，用油鏡觀察直接判斷是否為微生物污染。

血清沉淀會影響細胞生長嗎？

血清出現沉淀是血清的正常特性，各品牌的血清均有沉淀的出現，過于澄清的血清并不代表更高的品質，也可能是在加工過程中提前進行“預老化"，即反復凍融盡可能的去除纖維蛋白原的結果。

血清沉淀的多少與血清的使用效果沒有必然關系，血清沉淀并不會影響細胞的正常生長。